彼得·帕克<前任>MJ
四年前，彼得为保护MJ而让全世界遗忘自己，导致两人分手。四年后在MJ工作的咖啡店外偶遇，MJ已不记得他。
彼得·帕克<前挚友>奈德·利兹
奈德是彼得高中时期最好的朋友，知晓其蜘蛛侠身份。遗忘咒后，奈德考入麻省理工，与彼得失去联系。
彼得·帕克<对手>弗兰克·卡塞尔
惩罚者认为蜘蛛侠不杀人的原则过于天真，在追捕蝎子帮时与彼得发生激烈冲突，理念不合。
彼得·帕克<追缉者>比尔
DODC特工队长比尔将蜘蛛侠视为不受监管的威胁，在纽约危机中多次下令围捕蜘蛛侠。
彼得·帕克<死敌>麦克·加根
蝎子麦克·加根一直想向蜘蛛侠复仇。在本片中，他利用彼得身体异变的虚弱期，设下陷阱伏击蜘蛛侠。
彼得·帕克<求助者>布鲁斯·班纳
彼得因身体发生未知的骇人异变，生命受到威胁，主动前往寻找绿巨人布鲁斯·班纳博士寻求科学帮助。
彼得·帕克<嫌犯>DODC特工
DODC特工在街头巡逻时，将正在阻止犯罪的蜘蛛侠列为非法超能活动嫌犯并试图逮捕。
彼得·帕克<救援者>曼哈顿商人
曼哈顿商人在其公司大楼遭遇抢劫时，被蜘蛛侠及时救下。
彼得·帕克<抓捕者>撞槌
蜘蛛侠在捣毁蝎子帮的毒品仓库时，制服了其手下打手“撞槌”。
彼得·帕克<情敌>MJ的男友
彼得看到MJ与她的新男友在一起，内心复杂，但选择尊重MJ的新生活。
彼得·帕克<质询方>希拉·里维拉
号角日报主编希拉·里维拉持续在报纸上发布质疑蜘蛛侠动机和危险性的文章，彼得曾匿名打电话到报社辩解。
彼得·帕克<调查者>朗尼·汤普森·林肯
蜘蛛侠调查黑市流通的振金时，追踪到了供应商“墓碑”，双方在码头发生短暂交锋。
彼得·帕克<目击者>舞者
舞者在工作的夜店目睹了蝎子帮成员进行非法交易，后向偶然前来调查的蜘蛛侠提供了模糊线索。
彼得·帕克<邻居>女清洁工
女清洁工经常在彼得租住的破旧公寓走廊打扫，彼得曾帮她搬过沉重的垃圾袋。
彼得·帕克<潜入者>DODC仓库守卫
蜘蛛侠为获取DODC封存的关于自己身体的检测数据，潜入了其仓库，避开了守卫的巡逻。
彼得·帕克<侄孙>梅·帕克
梅婶是彼得唯一的亲人，在本片时间线四年前，因绿魔的袭击而牺牲，她的教诲“能力越大，责任越大”始终指引着彼得。
彼得·帕克<师徒>托尼·斯塔克
托尼·斯塔克是彼得的导师，曾为他制作战衣并教导他成为英雄。托尼的牺牲是彼得心中永远的痛和动力。
彼得·帕克<旧识>哈皮·霍根
哈皮是梅婶的前男友，也是托尼的朋友。在彼得孤独时，哈皮是少数知道他过去并偶尔给予他鼓励的人。
彼得·帕克<爆料者>米歇尔·琼斯
号角日报记者米歇尔·琼斯紧追蜘蛛侠的新闻，曾拍到彼得变异的模糊照片，迫使彼得不得不与她周旋。
彼得·帕克<化敌为友>弗林特·马尔科
沙人曾为救女儿而犯罪，与彼得交战。本片中，他在彼得陷入危机时出手相助，偿还旧情。
彼得·帕克<前对手>柯特·康纳斯
蜥蜴博士曾与蜘蛛侠多次交战。班纳博士在研究彼得变异时，曾远程咨询过康纳斯关于跨物种基因的知识。
彼得·帕克<债主>阿德里安·图姆斯
秃鹫在狱中得知蜘蛛侠身份被遗忘，认为彼得“欠”他一个被毁的人生，其旧部在本片中有提及此事。
彼得·帕克<复仇对象>昆汀·贝克
神秘客临死前伪造视频诬陷蜘蛛侠，导致彼得生活天翻地覆。彼得仍需面对其遗毒带来的公众质疑。
彼得·帕克<弑亲仇人>诺曼·奥斯本
绿魔诺曼·奥斯本杀害了梅婶，彼得虽未亲手杀他，但视其为导致一切悲剧的元凶之一。
彼得·帕克<劲敌>奥托·奥克塔维斯
章鱼博士的机械触手曾几乎杀死彼得。本片中，有线索表明其被封印的触手芯片可能流入了黑市。
彼得·帕克<宿敌>麦克斯·狄龙
电光人曾认为蜘蛛侠是他的朋友而后背叛。他的能量特征与彼得本次的身体异变有相似之处，被班纳博士列为参考案例。
彼得·帕克<暧昧>菲莉西亚·哈代
黑猫在盗窃目标物品时与蜘蛛侠相遇，她欣赏蜘蛛侠的身手，多次调情并留下谜题，试图将彼得拉入她的游戏。
彼得·帕克<旧同学>尤金·“闪电”·汤普森
闪电·汤普森在高中时常欺负彼得。现在他的播客经常讨论蜘蛛侠，彼得曾匿名拨打热线纠正他的一个错误谣言。
彼得·帕克<猎物>克莱文
猎人克莱文将狩猎蜘蛛侠视为终极挑战，他在纽约布下陷阱，并公开宣称要收藏蜘蛛侠的头颅作为战利品。
彼得·帕克<仰慕者>尤金·“闪电”·汤普森
闪电·汤普森的播客内容显示，他如今是蜘蛛侠的狂热粉丝，尽管他完全不知道彼得就是蜘蛛侠。
